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氨基酸分析仪检测复方氨基酸双肽注射液

2023-05-22

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摘要:

本品为15种氨基酸和2种双肽配制而成的灭菌水溶液,使用Biochrom30+全自动氨基酸分析仪对其所含的游离氨基酸组成进行分析。结果表明该复方氨基酸双肽注射液中氨基酸总量的浓度分别为:

样品1:7190.178umol/mL;

样品2:7258.812 umol/mL。

单个氨基酸含量,分别见附页结果表。


一、样品前处理

1、所用试剂

1.1 Loading Buffer:锂盐系统,pH 2.2

1.2 0.06mol/L 盐酸:取50mL 盐酸加水稀释至10mL,混匀

1.3 17种氨基酸标准品

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2、 前处理设备

1)分析天平:精度为 0.0001g

2)移液枪及枪头

3)0.22um滤膜

4)一次性注射器

5)低范围pH试纸

3、样品制备(参考2020中国药典二部)

将样品(注射液)吸取适量体积后,用Loading Buffer将其稀释至合适浓度。蘸取少量稀释后溶液至pH试纸上,观察其的pH值是否达到2.2。可用1.1、1.2试剂调节样品pH值至合适。

移液枪取上述溶液1mL至一次性注射剂,过滤膜,上机待测。


二、分析方法描述(Biochrom 30+)

氨基酸分析仪分析方法参数:

1)色谱柱:Biochrom Li型阳离子交换树脂柱,4.6´20cm

2)分离程序:

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3)运行时间:经分析时间+再生时间 168min

4)反应单元温度:135°C。

5)检测波长:570nm、440nm同时检测。


三、样品中氨基酸含量的计算

样品测定液氨基酸的含量按式(1)计算:

Ci = Cs/As × Ai× F ……………………(1)式中:

Ci ———样品测定液氨基酸i的含量,单位为纳摩尔每毫升(nmol/mL);

Cs ———氨基酸标准工作液氨基酸s的含量,单位为纳摩尔每毫升(nmol/mL);

Ai ———试样测定液氨基酸i的峰面积;

As ———氨基酸标准工作液氨基酸s的峰面积;

F ———样品稀释倍数。


附、复方氨基酸双肽注射液分析图谱及做样结果

图1.  样品1 稀释50倍

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图2.  样品1 稀释100倍

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图3.  样品2 稀释50倍

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图4.  样品2 稀释100倍

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