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Biochrom30+氨基酸分析仪蛋白水解图谱优化

2020-05-07

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一、标样配置

氨基酸混合标准储备液:含有天冬氨酸、苏氨酸等17种常见组成蛋白质的氨基酸。

 

17种氨基酸标准品

行号

氨基酸

行号

氨基酸

1

Asp       

天冬氨酸

2

Thr

苏氨酸

3

Ser       

丝氨酸

4

Glu

谷氨酸

5

Pro       

脯氨酸

6

Gly

甘氨酸

7

Ala       

丙氨酸

8

Cys

胱氨酸

9

Val       

缬氨酸

10

Met

蛋氨酸

11

Ile        

异亮氨酸

12

Leu

亮氨酸

13

Tyr

酪氨酸

14

Phe       

苯丙氨酸

15

His

组氨酸

16

Lys

赖氨酸

17

Arg

精氨酸

18



 

二、分析方法描述(Biochrom 30+

1)        色谱柱:Biochrom Na型阳离子交换树脂柱,4.6´20cm

2)        运行时间:常规分析时间+再生时间56min

3)        反应单元温度:135°C

4)        分离程序:

NO.

Time

Temp

Buffer

Pump

Nin

Rec

Commands

1

01:00

48

1

35.0ml/h

ON

OFF


2

00:00

48

1

35.0ml/h

ON

OFF

Reset

3

01:00

48

1

35.0ml/h

ON

OFF

Load

4

06:40

48

1

35.0ml/h

ON

ON


5

13:00

52

2

35.0ml/h

ON

ON


6

01:00

52

5

35.0ml/h

ON

ON


7

16:00

95

5

35.0ml/h

ON

ON


8

04:00

95

6

35.0ml/h

ON

ON


9

04:00

95

1

35.0ml/h

ON

ON


10

09:00

48

1

43.0ml/h

OFF

OFF


11

02:00

48

1

35.0ml/h

ON

OFF


End








 

三、蛋白水解图谱优化

image003.png

 

四、蛋白水解图谱优化原理及方法

Biochrom 30+系列提供的蛋白质水解产物程序可能需要稍做改动以达到在蛋白水解产物标准中的氨基酸分离,影响氨基酸分离的因素是:

缓冲液和有机溶剂的pH值和克分子浓度

缓冲液时间

分析柱温度

缓冲液流速

树脂床长度


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