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埃博拉病毒VP40影响细胞循环和细胞外囊泡的生物发生过程

2020-02-13

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背景:埃博拉病毒(EBOV)主要攻击骨髓细胞,其致命感染会引起大量的T细胞死亡。研究已证明,受感染细胞所产生的外泌体中包含的埃博拉病毒蛋白VP40导致了受体免疫细胞的死亡。


方法:通过克隆技术表达VP40,研究者分析了供体细胞循环、细胞外囊泡的生物发生过程和受体免疫细胞的死亡。通过激酶和染色质免疫沉淀实验,研究者研究了细胞周期蛋白D1的转录和VP40的核定位。通过质谱、细胞因子和蛋白质免疫印迹实验,研究者检测了细胞外囊泡的内含物。野生型埃博拉病毒感染实验在生物安全等级为4级的实验室平台进行。


结果:含有VP40的细胞外囊泡诱导了受体T细胞和单核细胞的凋亡。细胞周期蛋白D1的表达水平上调,导致了表达VP40的克隆加速生长,而核内的VP40蛋白会结合到细胞周期蛋白D1的启动子上。细胞循环被加快,会影响细胞外囊泡的生物发生过程,终产生了数量较少、但粒径更大的细胞外囊泡。含有VP40的细胞外囊泡的内含物富含能结合核糖核酸的蛋白和细胞因子(白细胞介素-15、转化生长因子-β1和干扰素-γ)。终,受埃博拉病毒感染的细胞及其细胞外囊泡中包含了VP40、核蛋白质和糖蛋白。


结论:细胞核内的VP40上调了细胞周期蛋白D1的表达水平,导致异常的细胞周期和异常的细胞外囊泡生物发生过程。被埃博拉病毒感染的细胞所产生的细胞外囊泡中包含的细胞因子和埃博拉病毒蛋白引起了免疫细胞的大量死亡。


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